胶原酶 来源于溶组织梭菌

3.4.24.3 ( BRENDA | IUBMB )

232-582-9

MFCD00130830

NA.54

胶原酶已用于动脉组织的制备，用于晚期糖基化终产物 (AGE) 的研究。该酶还与其他蛋白酶一起使用，用于人体肿瘤、小鼠肾、人脑、肺上皮等多种组织的解聚。在肝脏和肾脏灌注研究、胰腺的消化和非实质肝细胞的分离中也有效。
来自组织溶梭菌的胶原酶已被用于：

• 诱发小鼠脑出血(ICH)
• 消化3D胶原蛋白凝胶以进行免疫荧光分析
• 引起小鼠局灶性血液外渗和出血

有效地从组织中释放细胞需要胶原酶和中性蛋白酶的共同作用。每摩尔酶用 4 克原子钙 (Ca²⁺) 激活胶原酶。一般认为培养滤液至少含有 7 种不同的蛋白酶，分子量范围为 68-130 kDa(最适用 pH：6.3-8.8)。该酶识别序列-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-，其中 X 是最常见的中性氨基酸。
组织溶梭菌包含两类胶原酶。梭菌胶原酶比哺乳动物胶原酶更高效。它在胶原三螺旋中的多个裂解位点进行裂解。梭菌胶原酶可参与气体坏疽中的细菌入侵。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。

一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。

由 VII (C0773) 型制备。在 37℃ 下，将 0.05-0.1 mg 胶原酶溶于 1 mL 含 0.36 mM 氯化钙 (TESCA) 的 50 mM TES 缓冲液 (pH 7.4) 中，制备贮备液。

200

0.2 μm filtered

lyophilized powder

≥4 FALGPA units/mg solid
≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

chromatography

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 ℃

−20℃

GHS08

Danger

H334

P261 - P284 - P501

Resp. Sens. 1

11 - Combustible Solids

WGK 1

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves